毛细管电泳在多重 PCR 分析中的应用
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作者:201321492800086
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发布时间: 2898天前
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多重 PCR（multiplex PCR）是在普通 PCR 的基础上加以改进，于一个 PCR 反应体系中加入多对特异性引物，针对多个 DNA 模板或统一模板的不同区域扩增多个目的片段的 PCR 技术。由于多重 PCR 同时扩增多个目的基因，具有节省时间、降低成本、提高效率的优点，所以一经提出，发展迅速，多重 PCR 已经成为一项成熟而重要的研究手段。
多重 PCR（multiplex PCR）是在普通 PCR 的基础上加以改进，于一个 PCR 反应体系中加入多对特异性引物，针对多个 DNA 模板或统一模板的不同区域扩增多个目的片段的 PCR 技术。由于多重 PCR 同时扩增多个目的基因，具有节省时间、降低成本、提高效率的优点，所以一经提出，发展迅速，多重 PCR 已经成为一项成熟而重要的研究手段。
多重 PCR 技术在生命科学研究中应用广泛，可应用于病原微生物的检测与鉴别、基因诊断、肿瘤的诊断与研究、微卫星等方面。影响成败的主要技术因素有目的片段选择、引物设计、复性温度和时间、延伸温度和时间、各反应成分用量等，而成功的扩增之后的检测分析也是重要的一步。
某些多重 PCR 系统，特别是那些鉴别点突变或其他微小变化的系统，其 PCR 产物除琼脂糖凝胶电泳外，还需要进一步分析。许多已建立的单个 PCR 产物分析技术可以直接应用于多重 PCR 分析，如限制性内切酶消化、放射性探针杂交、毛细管电泳和单链构象多态性 (SSCP) 分析都可以用来做多重 PCR 产物的常规分析。
毛细管电泳技术分辨率高、灵敏度好、操作全自动化等特点使得其在多重 PCR 产物分析中的应用尤为普遍。
近几年由台湾光鼎公司开发的 Qsep100 毛细管电泳仪，由于其操作简便、成本低廉、速度快等特点受到广大科研工作者的喜爱。
依靠良好的实验设计或配合市场上成熟的试剂盒，Qsep100 仅需常规的 PCR 扩增引物（无需荧光标记），便可为您轻松实现食源性致病菌检测、消化道感染病原体、呼吸道病原体、传染病检测等多种致病菌的快速筛查与检测。采用专利的即用型笔式预制胶卡夹，高灵敏度 PMT 检测器检测，免去了繁琐、耗时的制胶、点样、拍照等步骤。 最佳分辨率可达 1-4bp，1-96 个样本灵活上样，数据分析简便灵活，可挑选任意结果进行统一分析。
配套使用以下多种多重检测试剂，并可兼容分析业界各类多重 PCR 试剂：
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常见食源性致病菌多重 PCR 检测试剂
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五种致泻性大肠埃希氏菌多重 PCR 检测试剂
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发热呼吸道病原体多重 PCR 检测试剂
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突发传染病多重 PCR 检测试剂
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肉及肉制品动物源性成分检测试剂
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耐药检测试剂
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其他多重核酸扩增检测应用可根据客户需要开发，提供技术支持
下图展示了操作程序及常见图谱：
sep100 全自动核酸蛋白分析系统也广泛用于 AFLP（amplified fragment length polymorphism，扩增片段长度多态性）/RFLP、SSR、NGS 质控、常规 PCR 产物检测等研究。
图示 Qsep100 简便操作：
常见多重检测结果图谱：
